高效毛细管电泳测定海马组织和脑脊液中氨基酸类神经递质

摘要

目的 建立测定大鼠海马组织和人脑脊液中氨基酸类神经递质的高效毛细管电泳分析方法.方法 用高效毛细管电泳技术,选用总长60 cm、有效长度50.5 cm、直径75 μm熔融石英毛细管,在20 kV电压下快速分离4种氨基酸.以100 mmol/L硼酸-三羟甲基氨基甲烷(Tris)(1∶1,含1%异丙醇)为电泳缓冲液(pH值为10.35),激光诱导荧光检测器进行检测,并对此方法进行方法学评价.同时检测45例患者脑脊液的氨基酸含量.结果 谷氨酸(GLU)、天冬氨酸(ASP)、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(GLY)4种氨基酸能在15 min内分离,线性范围为1.0～100.0 μmol/L,GLU、ASP、GABA、GLY最低检出限分别为10、23、18、15 nmol/L,4种氨基酸的批内精密度范围4.44%～9.72%,批间精密度范围6.96%～10.50%.4种氨基酸的回收率不低于88.1%.全面性大发作癫痫患者GLU、GLY、ASP含量显著高于对照组(P＜0.05),而GABA较对照组差异无统计学意义;复杂部分性发作癫痫患者4种氨基酸含量较对照组显著增加(P＜0.05).结论 高效毛细管电泳具有快速、灵敏、准确的特点,为临床和科研提供了一种有效的方法.