miR-424-5p靶向PHD2对骨性关节炎软骨细胞凋亡及炎症因子分泌的影响

摘要

目的:研究miR-424-5p对骨性关节炎软骨细胞凋亡、炎症因子分泌的影响及可能调控机制。方法:采用qRT-PCR法检测成人软骨细胞HC、成人骨性关节炎软骨细胞HC-OA中miR-424-5p、PHD2 mRNA的表达,Western blot法检测PHD2蛋白的表达。应用双荧光素酶报告实验检测miR-424-5p与PHD2的靶向关系。将HC-OA分为miR-NC组(转染miR-NC)、miR-424-5p组(转染miR-424-5p模拟物),采用qRT-PCR法检测miR-424-5p的表达,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,用ELISA检测细胞培养液上清中IL-6、IL-1β、IL-17的含量,同上检测PHD2 mRNA和蛋白的表达。另取HC-OA,分为miR-424-5p组、miR-424-5p+pcDNA组和miR-424-5p+pcDNA-PHD2组,分别检测细胞中miR-424-5p的表达、细胞凋亡情况及细胞培养液上清中IL-6、IL-1β、IL-17的含量。结果:与HC相比,HC-OA中miR-424-5p表达降低,PHD2 mRNA和蛋白的表达升高(P<0.05)。miR-424-5p与PHD2基因存在靶向关系。过表达miR-424-5p能够抑制HC-OA细胞的凋亡,炎症因子IL-6、IL-1β、IL-17的分泌,及PHD2 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。过表达PHD2可降低HC-OA细胞中miR-424-5p的表达,促进细胞凋亡和炎症因子IL-6、IL-1β、IL-17的分泌(P<0.05)。结论:miR-424-5p可通过靶向PHD2抑制关节炎软骨细胞的凋亡和炎症因子的分泌。