过表达E1A激活基因阻遏子对OxLDL诱导的血管内皮细胞损伤的影响

摘要

目的:研究过表达E1A激活基因阻遏子(CREG)对氧化低密度脂蛋白(OxLDL)诱导的血管内皮细胞损伤的影响.方法:血管内皮细胞分为4组,空白对照组不处理;OxLDL组用100 mg/L OxLDL处理24 h;另2组分别感染对照逆转录病毒(阴性对照组)和pLNCX-CREG重组逆转录病毒(pLNCX-CREG组),之后均用100 mg/L OxLDL处理24 h.用Real-time PCR和Western blot法检测4组细胞CREG mRNA和蛋白的表达,用硫代巴比妥酸法检测培养液中丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)活性,DCFH-DA法检测培养液中活性氧(ROS)水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞中活化的Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白的表达水平.结果:与空白对照组比较,OxLDL组细胞中CREG mRNA和蛋白表达水平均降低;pLNCX-CREG组细胞中CREG mRNA和蛋白表达水平均较OxLDL组升高(P＜0.05).与空白对照组比较,OxLDL组细胞SOD活性降低,MDA和ROS水平升高,细胞凋亡率和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平均升高;与OxLDL组比较,pLNCX-CREG组细胞氧化损伤指标的变化被逆转,细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3蛋白表达水平均降低(P＜0.05).结论:过表达CREG可以抑制OxLDL诱导的血管内皮细胞氧化损伤并抑制细胞凋亡.