不同质量浓度胰蛋白酶和EDTA细胞消化分离液对人表皮细胞生长的影响

摘要

目的:探讨人表皮生物工程的适宜条件.方法:以NIH-3T3细胞作为滋养层,以热溶素分离表皮与真皮,将表皮应用4组不同质量浓度的胰蛋白酶(T)和EDTA(E)的消化液(A组:0.5 g/L T加0.2 g/L E,B组:2.5 g/L T加0.2 g/L E,C组:0.5 g/L T加1 g/L E,D组:2.5 g/L T加1 g/L E)消化为单个细胞.表皮细胞接种于含8种成分的DMEM-F12的完全培养液中.记录接种表皮细胞的克隆形成率、扩增倍数以及融合时间.结果:接种表皮细胞的克隆形成率和扩增倍数分别是:A组为(10.00±0.09)%和(500.00±9.63)倍,B组为(7.00±0.12)%和(350.00±6.16)倍,C组为(17.00±0.18)%和(850.00±8.83)倍,D组为(14.00±0.19)%和(700.00±9.55)倍,4组间差异均有统计学意义(P＜0.05).接种表皮细胞的融合时间:A组为第(10.00±0.82)天,B组为第(10.00±0.82)天,C组为第(11.50±1.29)天,D组为第(12.00±2.45)天.4组的接种表皮细胞克隆形成率与融合时间无关.结论:同一质量浓度的EDTA作用下,0.5 g/L胰蛋白酶组比2.5 g/L胰蛋白酶组更有利于表皮细胞克隆的形成和融合.