沉默精氨酸琥珀酸合成酶对SMMC-7721细胞增殖、凋亡的影响

摘要

目的:探讨shRNA靶向沉默精氨酸琥珀酸合成酶(ASS1)基因后对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞增殖、凋亡的影响。方法:应用RT-PCR及Western blot检测5种肝癌细胞系中ASS1的表达情况;将shRNA-ASS1转染入SMMC-7721细胞(shRNA-ASS1组),同时设空白对照组和阴性对照组,观察转染后细胞的生长变化,运用Western blot鉴定其对ASS1基因的沉默效果;采用CCK-8法检测各组转染3 d后的细胞增殖情况;流式细胞术检测各组转染24 h后细胞凋亡的情况。结果:ASS1 mRNA和蛋白在Changliver、SMMC-7721、QGY-7703、HepG2和Hep G3B细胞中的表达差异有统计学意义(F_(mRNA)=1 129.140,F_(蛋白)=1 114.240,P均<0.001),ASS1在SMMC-7721和Hep G3B肝癌细胞系中呈高表达。CCK-8实验显示,与阴性对照组及空白对照组相比,shRNA-ASS1组细胞增殖率降低(F=7.176,P=0.007)。细胞凋亡实验显示,shRNA-ASS1组细胞凋亡率高于阴性对照组和空白对照组(F=88.120,P<0.001)。结论:沉默ASS1基因可抑制SMMC-7721细胞增殖,诱导细胞凋亡。