TGF-β2、TGF-β3启动子甲基化在TCDD诱发小鼠腭裂过程中的作用

摘要

目的:探讨转化生长因子β(TGF-β)2、TGF-β3启动子甲基化模式在2,3,7,8-四氯二苯并对二噁英(TCDD)诱导腭裂发生中的作用。方法:将42只C57BL/6N孕鼠分为对照组和TCDD组,每组各21只。在妊娠第10天(GD10)暴露于64μg/kg TCDD建立腭裂小鼠模型,对照组采用等体积的玉米油灌胃。3~5 d后分别收集胎鼠头部用于后续检测。HE染色观察GD13~GD15胎鼠的腭部发育,取GD14胎鼠腭组织检测TGF-β2和TGF-β3启动子甲基化水平,利用qRT-PCR检测GD13~GD15胎鼠腭组织中TGF-β2、TGF-β3 mRNA的表达水平。结果:HE染色显示TCDD组胎鼠出现腭裂,而对照组未见腭发育异常。与对照组相比,TCDD组TGF-β2片段1的CpG10位点甲基化水平降低;TGF-β2片段2中以下CpG位点甲基化水平升高:CpG14、CpG18.19、CpG25和CpG29;而CpG32.33.34甲基化水平降低;TGF-β3片段1中,CpG2.3、CpG16.17.18位点均出现甲基化水平升高;TGF-β3片段2的CpG6甲基化水平升高,而CpG18甲基化水平降低(P<0.05)。与对照组相比,TCDD组GD13~GD15胎鼠腭组织中TGF-β2和TGF-β3 mRNA表达均降低(P<0.05)。结论:TCDD可能使TGF-β2和TGF-β3启动子部分位点发生甲基化而影响TGF-β2和TGF-β3在胎鼠腭部的表达,从而导致腭裂。