TK自杀基因的构建及鉴定

摘要

目的 利用分子生物学技术,构建胸苷激酶基因(TK)自杀基因并测定其结构,为该自杀基因的进一步研究提供良好的实验基础.方法 以人类单纯疱疹病毒Ⅰ(HSV1)基因组DNA为模板,利用聚合酶链反应(PCR)法,扩增出约为1 100 bp TK基因,定向克隆到载体PEGM-T,构建克隆载体.两端分别引入限制性内切酶Not Ⅰ、Xhol Ⅰ酶切位点,经PCR及酶切鉴定初步证实为重组体后,测序认证.结果 经PGR、酶切鉴定和测序鉴定完成TK基因的构建,同源性高达98.70%,完全具备表达该目的 基因的要求.结论 成功扩增出TK基因,为继续研究打下基础.