过表达微RNA-590-3p对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制

摘要

目的 探讨微RNA-590-3p(miR-590-3p)过表达对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及其机制.方法 将24只Sprague Dawley大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、阴性对照(NC)组和agomir-miR-590-3p组,每组6只.模型组、NC组和agomir-miR-590-3p组大鼠通过左冠状动脉结扎法制备MIRI模型,agomir-miR-590-3p组大鼠于结扎前经左心室前壁注入5 nmol agomir-miR-590-3p,NC组大鼠于结扎前经左心室前壁注入5 nmol agomir NC,模型组大鼠注入等量生理盐水;假手术组大鼠仅做开胸和心脏分离不进行结扎,并经左心室前壁注入等量生理盐水.模型制备后4组大鼠经腹主动脉取血,分离血清保存备用;断颈法处死大鼠,取心肌组织用于后续实验.采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠心肌组织中miR-590-3p相对表达量,苏木精-伊红染色法观察大鼠心肌组织病理改变,酶联免疫吸附实验检测大鼠血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测大鼠心肌细胞凋亡率,Western blot法检测大鼠心肌组织中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)基因、Bcl-2相关X(Bax)蛋白表达水平.结果 agomir-miR-590-3p组大鼠心肌组织中miR-590-3p相对表达量显著高于假手术组、模型组、NC组(P0.05).假手术组大鼠心肌纤维结构完整,细胞排列整齐;模型组和NC组大鼠心肌纤维断裂,细胞排列较乱,部分细胞出现坏死;与模型组和NC组相比,agomir-miR-590-3p组大鼠心肌纤维断裂和心肌细胞排列紊乱情况得到缓解.模型组、NC组和agomir-miR-590-3p组大鼠血清IL-1β、TNF-α、CK、LDH、MDA水平显著高于假手术组,SOD水平显著低于假手术组(P0.05).模型组、NC组和agomir-miR-590-3p组大鼠心肌细胞凋亡率、心肌组织Bax蛋白表达水平显著高于假手术组,Bcl-2蛋白表达水平显著低于假手术组(P0.05).结论 过表达miR-590-3p能够改善MIRI,该作用可能与其减少氧化应激及炎症反应、抑制心肌细胞凋亡有关.