sFlt-1对人单核细胞系THP-1细胞向VEGF迁移的抑制作用

摘要

目的 探讨可溶性血管内皮生长因子受体1[sFlt-1(1-3)]对人单核细胞系THP-1细胞向血管内皮生长因子(VEGF)迁移的抑制作用.方法 应用腺病毒包装系统构建携带人sFlt-1(1-3)/FLAG融合基因的重组腺病毒载体(Ad-sFlt-1/FLAG).应用酶联免疫吸附实验(ELISA)和免疫荧光分析所构建的重组腺病毒载体在L293细胞中的表达.通过Transwell实验观察sFlt-1(1-3)对THP-1细胞向VEGF迁移的抑制作用.分别观察5种浓度(0、0.1、1、10和100 ng/mL)的VEGF对THP-1的趋化作用.观察4种浓度(0.1、1、10和100 ng/mL)的sFlt-1(1-3)/FLAG表达上清对THP-1细胞向VEGF迁移的抑制作用.结果 成功构建了Ad-sFlt-1/FLAG融合基因的重组腺病毒载体,通过ELISA和免疫荧光检测显示构建的腺病毒载体携带的sFlt-1(1-3)基因能够在L293细胞中得到表达.在感染重组腺病毒(Ad-sFlt-1/FLAG)的L929细胞培养上清可以检测到sFlt-1(1-3)/FLAG蛋白的表达,浓度为503.7 ng/mL.VEGF终浓度为1、10和100 ng/mL时,迁移的THP-1细胞数高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).sFlt1(1-3)/FLAG浓度为100 ng/mL时THP-1细胞迁移数约为sFlt1(1-3)/FLAG浓度为0 ng/mL时的25.7%.结论 VEGF对THP-1细胞具有趋化作用,sFlt-1(1-3)可以有效地抑制THP-1细胞向VEGF迁移.