法舒地尔对高糖培养肾小管上皮细胞增殖和纤维化的影响

摘要

目的:探讨法舒地尔(Fasudil)对高糖培养的肾小管上皮细胞(HK-2)增殖和纤维化的影响。方法:将HK-2细胞分为正常对照组(NG组,葡萄糖浓度5.5 mmol/L)、高张组(HM组,葡萄糖浓度5.5 mmol/L+甘露醇54.5 mmol/L)、高糖组(HG组,葡萄糖浓度60 mmol/L)、高糖+小剂量法舒地尔干预组[FA(5)组,D-葡萄糖60 mmol/L+法舒地尔5μmol/L]、高糖+中剂量法舒地尔干预组[FA(10)组,D-葡萄糖60 mmol/L+法舒地尔10μmol/L];6高糖+大剂量法舒地尔干预组[FA(20)组,D-葡萄糖60 mmol/L+法舒地尔20μmol/L]。四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定HK-2细胞增殖;免疫共沉淀法检测p-MYPT1-Thr853;Western印迹法检测结缔组织生长因子(CTGF)的表达;ELISA法检测细胞培养上清液转化生长因子β1(TGF-β1)和纤维连接蛋白(Fn)的含量。结果:与NG组比,HG组HK-2细胞出现增殖增加,p-MYPT1-Thr853、TGF-β1、CTGF和Fn的表达增加。与HG组比,FA(5)组、FA(10)组、FA(20)组均抑制了HK-2细胞的过度增殖,p-MYPT1-Thr853、TGF-β1、CTGF和Fn的表达均减少。结论:法舒地尔可能通过抑制Rho激酶活性抑制高糖培养的肾小管上皮细胞增殖和纤维化。