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抗SMO多克隆抗体对DU145前列腺癌细胞生长及侵袭力的影响

         

摘要

目的探讨抗SMO多克隆抗体对DU145前列腺癌细胞生长及侵袭能力的影响。方法预测SMO蛋白抗原表位并制备SMO抗体,评估其效价和特异性;实验分组包括空白对照组、兔IgG抗体处理组、抗SMO抗体处理组、shRNA空载对照组、TRPC-6蛋白shRNA稳转细胞处理组以及合并正常IgG抗体和抗SMO抗体处理组。MTT法和细胞凋亡实验检测抗SMO抗体对DU145细胞增殖和细胞凋亡的影响;Transwell实验检测抗SMO抗体对正常以及稳转TRPC-6shRNA蛋白的DU145细胞侵袭能力的影响。结果制备的抗体效价为1∶51 200,且抗体特异性良好;随着抗SMO抗体浓度的升高,细胞存活百分比逐渐下降(P<0.05),随着时间的发展,48 h和72 h之间的细胞存活百分比存在差异(P<0.05)。凋亡实验显示,早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)凋亡百分比在抗SMO抗体处理组较空白对照组中明显升高(P<0.05),随着抗体浓度的升高,凋亡百分比逐渐升高。Transwell实验显示,随着抗SMO抗体的处理,细胞的细胞侵袭抑制率逐渐升高(P<0.05),TRPC-6蛋白shRNA稳转DU145细胞处理组中,随着抗体浓度的升高,细胞的细胞侵袭抑制率逐渐升高(P<0.05)。结论抗SMO多克隆抗体对正常以及TRPC-6蛋白shRNA稳转的DU145细胞生长以及侵袭能力均有明显的抑制作用,为临床治疗前列腺癌提供一个潜在的方向。

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