特异基因的PCR扩增及其快速克隆

摘要

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，直接从微生物基因组中扩增卡介苗Ａｇ８５－Ｂ编码基因。虽然在引物５＇端设计了限制性内切酶识别顺序以及附加顺序，但因限制性内切酶不能切开这些顺序，使扩增基因产物不能克隆到质粒载体中。因此，我们构建了新的克隆载体即Ｔ载体，专门用于克隆未经任何修饰的ＰＣＲ产物；这种方法价廉，快速有效，值得推广应用。