替莫唑胺诱导的耐药细胞系U251/TR的构建及衣霉素对其耐药性的逆转作用

摘要

目的构建替莫唑胺（temozolomide,TMZ）耐药细胞系U251/TR,并观察衣霉素（tunicsmycin,Tm）逆转对替莫唑胺耐药细胞系U251/TR细胞的作用。方法采用替莫唑胺对U251细胞进行体外分步诱导,产生耐药的U251/TR细胞系;CCK-8法检测TMZ对U251和U251/TR细胞增殖抑制作用,计算半数抑制浓度（IC50）,得到U251/TR细胞系对TMZ的耐药指数（RF）;采用细胞集落法确定U251/TR的耐药性;将Tm联合TMZ作用于U251/TR细胞系,采用CCK-8法分别测定不同给药组细胞的增殖抑制作用。结果通过体外分步诱导法成功地建立了对TMZ具有稳定耐药性的U251/TR细胞株。CCK-8法检测结果显示,U251/TR的耐药指数约为5.2;细胞集落法确定诱导过程中的U251/TR的耐药性为1.2-3倍。Tm和TMZ联合应用呈协同效应。结论成功建立了由TMZ诱导的人脑胶质瘤耐药细胞株U251/TR。Tm联合TMZ能显著逆转U251/TR细胞系的耐药性。