硫化氢对化学性缺氧诱导PC12细胞凋亡的影响

摘要

[目的]探讨硫化氢(H_2S)对抗二氯化钴(CoCl_2)诱导PC12细胞凋亡的作用及其初步机制.[方法]应用化学性缺氧模拟剂CoCl_2在PC12细胞建立化学性缺氧损伤模型;以硫氢化钠(NaHS)作为H_2S的供体;应用CCK-8比色法检测细胞存活率;碘化丙啶(PI)染色流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率;Hoechst33258染色检测细胞凋亡的形态学变化;罗丹明123(Rh123)染色荧光显微镜照相检测细胞线粒体膜电位(MMP);2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色荧光显微镜照相检测细胞内的活性氧(ROS)水平.[结果] COCl_2引起PC12细胞的存活率显著降低及凋亡率明显增加,同时引起PC12细胞的MMP明显降低及ROS生成显著增加.在600μmol/L CoCl_2处理PC12细胞前,应用100～400 μmol/L NaHS预处理30 min,呈浓度依赖性地阻断CoCl_2引起PC12细胞的存活率降低;200 μmol/L、400 μmol/L NaHS预处理能显著地降低600 μmol/L CoCl_2引起PC12细胞的凋亡率增加并阻断CoCl_2引起的MMP降低及ROS升高.[结论]H_2S具有神经细胞保护作用,能明显地对抗CoCl_2诱导的PC12细胞凋亡,此作用可能与其减少ROS生成,提高MMP有关.