Combretastatin A4 Phosphate对人晶状体上皮细胞增殖及迁移的影响

摘要

【目的】研究Combretastatin A4 Phosphate(CA4P)对晶状体上皮细胞系SRA01/04增殖及迁移影响,初步探讨其抑制细胞增殖的机制。【方法】以晶状体上皮细胞系SRA01/04为实验对象,设空白对照组及CA4P组,分别以PBS或1μmol/L CA4P处理15 min,于0、24、48、72 h后进行检测。通过WST-1法检测细胞增殖能力;划痕试验检测细胞迁移能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞死亡方式;PI染色法检测细胞周期;免疫荧光法检测细胞骨架蛋白(α-微管蛋白、F-肌动蛋白)及细胞形态。【结果】CA4P对细胞增殖的抑制作用呈时间依赖性,24、48、72 h细胞相对增殖活性分别为73%、40%、34%(P<0.05)。空白对照组细胞划痕面见大量细胞覆盖;CA4P组划痕面无细胞覆盖,细胞呈细小圆形,可见部分细胞脱落漂浮。CA4P组24、48、72 h细胞凋亡率为19.7%、43.6%、72.2%,明显高于对照组(1.7%、2.2%、3.6%;P<0.05)。CA4P组各时间点G2/M期分布分别为30.3%、55.4%、70.8%,明显高于对照组(4.4%,9.0%,7.9%;P<0.05)。CA4P组细胞内微管纤维丝状结构消失,可见多核、巨核等有丝分裂障碍表现,但F-肌动蛋白未见明显变化。【结论】1μmol/L CA4P短时间作用于SRA01/04晶状体上皮细胞可明显抑制其增殖和迁移,且作用呈时间依赖性。CA4P抑制细胞增殖可能机制是通过解聚微管蛋白,诱导有丝分裂停止而诱发SRA01/04细胞凋亡。