flk-1基因在胎肝造血细胞增殖中的调控作用

摘要

【目的】探讨flk-1基因在胎肝造血细胞体外扩增中的调控作用。【方法】体外培养E14胎肝造血细胞，应用Western—Blot检测flk-1配基VEGF及其抑制剂SU5416对E14胎肝造血细胞flk-1蛋白表达水平的影响，通过细胞计数、氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入实验及细胞周期分析观察flk-1配基VEGF及其抑制剂SU5416对E14胎肝造血细胞增殖的影响．造血集落CFU—GM（colony—forming unit-granulocyte／macrophage粒-巨噬细胞系集落形成单位）培养检测造血祖细胞的功能状态。【结果】VEGF或VEGF加SU5416均可促进胎肝造血细胞的增殖，细胞数目分别为对照组的108％和142％，并且集落数量也显著增加，分别为对照组的159％和151％（P〈0．01）；单独应用SU5416使造血细胞的数目较对照组减少了8％，但集落产率与对照组无显著性差异。Western blot结果经统计学分析，SU5416组和VEGF加SU5416组flk-1蛋白表达强度分别为对照组的165％（P〈0．01）和57％（P〈0．05），与对照组相比有显著性差异。【结论】VEGF受体flk-1和flt-1均参与介导VEGF对胎肝造血细胞增殖的调控作用。SU5416阻断flk-1信号转导可上调flk-1的蛋白表达，Flt-1活化可下调flk-1的蛋白表达。