钙激活中性蛋白酶1与口腔鳞状细胞癌迁移及侵袭的相关性

摘要

目的在细胞和分子水平中探讨钙激活中性蛋白酶1(calcium activated neutral protease 1,CAPN1)与口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞侵袭、转移等行为是否存在相关性。方法选用永生化正常口腔黏膜上皮HOK细胞株作为对照组(正常组),2个不同来源的口腔鳞癌(OSCC)细胞株HSC3、CAL27作为实验组(肿瘤组),通过蛋白质印迹法(Western blot)探讨CAPN1在正常和肿瘤细胞中的表达情况。以OSCC细胞株中的两组HSC3、CAL27细胞为研究对象,将这两组细胞随机分为siRNA1-1组(将siRNA CAPN1-1转染到两组OSCC细胞中)、siRNA1-2组(将siRNA CAPN1-2转染到两组OSCC细胞中)及siRNA-neg组(将非特异性siRNA(siNC)转染到的两组OSCC细胞中)作为对照组。应用PCR法和Western blot检测转染后细胞内CAPN1mRNA和蛋白水平的变化。应用Transwell小室设计肿瘤细胞迁移、侵袭实验,检测转染后细胞迁移、侵袭能力的变化。结果Western blot表明CAPN1在肿瘤组中的表达高于正常组(P<0.05);通过PCR法和Western blot实验发现两组细胞HSC3、CAL27中,与siRNA-neg组相比,siRNA1-1组、siRNA1-2组中CAPN1mRNA的表达均明显受到抑制,差异均有统计学意义(P<0.05);通过Transwell小室实验发现siRNA1-1组与siRNA1-2组较siRNA-neg组迁移及侵袭能力均减弱,显微镜下穿膜数目均减少,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论CAPN1可升高口腔鳞癌细胞迁移、侵袭能力,可能在口腔鳞癌的发生发展中发挥了重要作用。