用PCR-RFLP技术鉴别鲁道夫对盲囊线虫姊妹种的研究

摘要

用保守引物扩增鲁道夫对盲囊线虫Contracaecum rudolphii姊妹种和C. septentrionale rDNA第一内转录间隔区(ITS-1)片段并纯化,根据鲁道夫对盲囊线虫A、鲁道夫对盲囊线虫B和C. septentrionale rDNA ITS-1序列,选用限制性内切酶Msp Ι和Nsi I酶切,酶切产物用琼脂糖凝胶电泳分析. 结果经Msp Ι酶切后,鲁道夫对盲囊线虫姊妹种与C. septentrionale表现出不同的条带;经Nsi Ι酶切后,鲁道夫对盲囊线虫B和C. septentrionale结果一致,与鲁道夫对盲囊线虫A不同. 用Msp Ι可以鉴定出C. septentrionale,用Nsi Ι可以鉴定出鲁道夫对盲囊线虫A,2个限制性内切酶合用可以将鲁道夫对盲囊线虫A、鲁道夫对盲囊线虫B以及C. septentrionale分别鉴定出来. 根据鲁道夫对盲囊线虫A、鲁道夫对盲囊线虫B以及C. septentrionale rDNA ITS-1基因序列建立的鲁道夫对盲囊线虫姊妹种PCR-RFLP鉴别技术能够对鲁道夫对盲囊线虫姊妹种进行准确、特异和简便的鉴别.