琼脂糖电泳凝胶中回收微量DNA片段的新方法

摘要

对现有的 DNA片段回收方法进行了改进 .琼脂糖凝胶中目的 DNA片段条带切割后 ,浸入适量的 TE溶液 (0 .2～ 0 .4 m L/ g琼脂糖胶 ) ,在 37℃水浴保温 1 5 min,以溶出凝胶中的 DNA,利用相应的引物对浸出的微量DNA样品进行与原 PCR反应相同条件下的 PCR扩增 ,直接用 75 %乙醇沉淀后 ,适量 TE溶解得到回收的目的DNA样品 .此法回收的 DNA片段可用于分子克隆 ,特别是适用于 TA载体的克隆与测序 ,适合大批量微量样品的准确回收 ,防止了因试剂盒回收造成的微量