肿瘤相关抗原17-1A在毕赤酵母中的表达与鉴定

摘要

目的利用P ich ia p astoris酵母表达系统表达糖基化的肿瘤相关抗原17-1A,为进一步设计肿瘤蛋白疫苗提供研究基础。方法通过RT-PCR从小鼠肾组织中扩增17-1A的cDNA,将其定向克隆到pP ICZαA质粒上,获得重组质粒pP ICZαA-17-1A,测序正确后,重组质粒电转化到P ich ia p astoris酵母菌株G S115中,在甲醇诱导下,利用其AOXⅠ基因的α信号肽,分泌表达17-1A抗原糖蛋白,并对获得的蛋白进行SDS-PAGE及W estern b lot分析鉴定。结果构建了pP ICZαA-17-1A重组质粒,通过电转化将目的基因整合入酵母基因组中,重组毕赤酵母表达能够表达17-1A抗原并检测到抗原发生了糖基化。结论能够通过毕赤酵母表达系统稳定表达糖基化的肿瘤相关抗原17-1A。