高原脑水肿小鼠模型的建立与鉴定

摘要

目的 建立高原脑水肿(high altitude cerebral edema, HACE)动物模型,探寻能导致明显HACE临床表征的海拔条件,为进一步研究HACE的发病机制和干预策略奠定基础。方法 选取8周龄雄性BALB/c小鼠,分为对照组(Control)和HACE组。Control组常压常氧处理(10只);HACE组置于低压低氧舱内,模拟4 000 m、5 000 m、6 000 m海拔高度,分别处理6 h、12 h、24 h、48 h、72 h,每个海拔高度每时点处死10只。HE染色观察脑组织形态学改变,以选择合适的模拟海拔建立显著的HACE模型并鉴定造模结果。HACE模型鉴定方法:称重检测脑水肿,Evans blue(EB)检测血脑屏障(brain-blood barrier, BBB)通透性、免疫荧光染色检测细胞凋亡情况。结果 海拔4 000 m和5 000 m时无小鼠死亡,海拔6 000 m时小鼠死亡率为12.2%。HE染色显示脑组织形态和结构在海拔4 000 m无明显改变;在海拔5 000 m的48 h、72 h组可见少许脑细胞水肿。海拔6 000 m构建的HACE模型最为显著,各组HE染色均出现脑细胞体积增大、肿胀,以24 h、48 h、72 h为甚,并出现细胞排列紊乱、间隙增大及核固缩;模型鉴定示海拔6 000 m构建的HACE模型小鼠脑水肿和EB通透率12 h后增加,各时点无明显细胞凋亡。结论 用低压低氧舱模拟海拔6 000 m(气压47.19 kPa、氧分压9.73 kPa)可有效建立HACE模型。