柱前衍生高效液相色谱法分析制革皮屑水解物的氨基酸组成

摘要

采用柱前衍生高效液相色谱法对制革皮屑及其4种水解物的氨基酸组成进行了检测分析。样品用6 mol/L HCl于110℃水解10 h,然后经异硫氰酸苯酯衍生后进行HPLC检测。色谱柱为Inertsil ODS-3 C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相分别为乙腈和0.1 mol/L乙酸钠水溶液,进样量为20μL,柱温为40℃,流速为0.8 mL/min,检测波长为254 nm。实验结果显示,采用该分析方法可以准确地测定皮屑及其水解物的氨基酸组成。皮屑酶水解物的氨基酸组成与皮屑有一定的差异,经537酶、1398酶和2709酶制得的皮屑水解物的甘氨酸含量均低于皮屑,而它们的碱性氨基酸含量较皮屑高;经537酶和1398酶制得的皮屑水解物的酸性氨基酸含量低于皮屑,而采用2709酶制得的水解物的蛋氨酸含量约是皮屑的2倍。本研究为皮胶原样品中氨基酸组成的检测提供了一种有效的方法。