适合于延龄草的ISSR体系的建立

摘要

以延龄草基因组DNA为模板,对ISSR反应体系中的一些重要参数进行了探索和优化实验,确立了适合延龄草的ISSR反应体系,即20μL反应体积中,模板DNA为20 ng、引物浓度为0.6μM、dNTP浓度为0.6 mM、Taq DNA聚合酶1 U.反应循环过程为:94℃变性30 s、52℃退火45 s、72℃延伸2 min、45个循环,72℃延伸7 min.该体系重复性和稳定性都较好,可有效地应用于延龄草遗传多样性的研究.