Taq DNA聚合酶制备技术的优化

摘要

以酶蛋白表达量、酶活性和比活性为指标,从工程菌菌株、转化方法、诱导表达时间、诱导剂浓度4个方面,对Taq DNA聚合酶制备技术进行了优化筛选.用JM109菌株制备的总酶活力高于DH5α,电击法的转化率高于热激法,用1.0 mmol/L IPTG诱导12 h,酶蛋白表达量、酶活性和比活性均显著高于其他浓度和时间的处理.SDS-PAGE电泳和PCR扩增结果表明,用优化技术制备的Taq DNA聚合酶,纯度、酶活力和特异性均达到分子生物学实验的要求,各项指标优于市售商品酶.