猪瘟伪狂犬病重组病毒SA215(A)疫苗株的构建(初报)

摘要

采用磷酸钙转染系统,将伪狂犬病三基因缺失疫苗SA215株DNA与PP63LacZE2 DNA共转染Vero细胞,获得SA215(A)1、SA215(A)2和SA215(A)3等12个重组病毒株.以光生物素标记的HCV E2基因为探针进行初步鉴定后,挑选SA215(A)1株作BamHⅠ酶切和southern转印杂交鉴定,结果表明构建是成功的,将其命名为SA215(A).直接荧光抗体检测、SDS-PAGE电泳和western免疫印迹检测结果表明HCV E2基因在重组病毒内获得表达,产生大小约51kd的蛋白.对SA215(A)株进行部分生物学特性研究,培养特性观察试验表明该毒株可适应Vero、BHK21和鸡胚成纤维细胞等多种细胞,但对不同细胞系表现有一定的差异.