西瓜种植物RAPD分析影响因子的研究

摘要

以西瓜种内的１２个品种（系）为模板ＤＮＡ，研究了影响ＲＡＰＤ扩增效果的因素。结果表明，模板ＤＮＡ、Ｔａｑ酶、随机引物、Ｍｇ２＋浓度以及ＰＣＲ反应程序在ＲＡＰＤ分析中都具有重要的作用。根据以上因子的研究结果，建立了适合西瓜种植物的ＲＡＰＤ分析的技术体系：１０μＬ反应液中，模板１０ｎｇ／１０μＬ，引物０５μｍｏｌ／Ｌ，ＴｒｉｓＨＣｌ（ｐＨ８３）５０ｍｍｏｌ／Ｌ，ＢＳＡ５００μｇ／ｍＬ，ＭｇＣｌ２２５ｍｍｏｌ／Ｌ，ＴａｑＤＮＡ０６Ｕ／１０μＬ，ｄＮＴＰｓ２００μｍｏｌ／Ｌ，１０％蔗糖４００和１ｍｍｏｌ／Ｌ甲酚红。