咳嗽变异性哮喘的差异蛋白膜联蛋白-1的表达及分析

摘要

目的:研究咳嗽变异性哮喘患者与健康对照者肺泡灌洗液(broncho alveolar lavage fluid,BALF)中有意义的差异蛋白点.方法:选取2016年3月至2016年9月佳木斯大学附属第一医院收治的32例咳嗽变异性哮喘患者为研究对象,作为观察组;选取同期32例健康志愿者为对照组.去除2组研究对象的BALF中的高丰度蛋白,给2组BALF标本分别建立双向凝胶电泳图谱,运用质谱技术得到BALF的蛋白质指纹图谱,筛选出差异表达的蛋白质,再应用生物信息学方法选定其中的一种候选蛋白.结果:凝胶电泳图谱显示,观察组BALF与对照组相比,共有23个蛋白斑点显著异常,经过与质谱分析的指纹图谱进行匹配分析,并结合数据库,初步鉴定出12个蛋白质,其中上调的蛋白质点有:巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、程序性细胞死亡基因4(PDCD4)、克拉拉细胞蛋白16(Clara cell protein 16,CC-16)、甲状腺素运载蛋白(transthyretin)、免疫球蛋白结合因子(immunoglobulin binding factor,IgBF)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂S(cystatin S);下调的蛋白质点有:溶菌酶(lysozyme)、蛋白激酶PakZ、GTP ase Cdc42、膜联蛋白-1(annexin-1)、热休克蛋白Mot-2、乳铁蛋白(lactoferrin).对下调蛋白膜联蛋白-1进行浓度测定,观察组的膜联蛋白-1浓度显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:用质谱分析鉴定了23个超过3倍差异的蛋白质,其中,共有12个蛋白质被鉴定,生物信息学进一步分析显示膜联蛋白-1能被当成候选蛋白进行更深层次的研究.膜联蛋白-1在哮喘BALF中的表达显著下降,其与哮喘的发病机制密不可分,故能将膜联蛋白-1作为哮喘发病的潜在蛋白标记物.