根瘤农杆菌T-DNA插入介导的烟曲霉耐药突变菌的分子机制

摘要

目的 探讨一株根瘤农杆菌T-DNA插入介导的烟曲霉突变菌(M7)耐药性产生的分子机制.方法 通过基因组重测序鉴定M7中T-DNA的插入位置并分析SNP位点,然后在烟曲霉A1160背景上将相应的突变基因进行敲除并验证.敲除成功后,比较分析敲除菌和野生型菌株的表型.结果 通过基因组重测序发现M7中T-DNA的插入位点位于基因Afu5g08910中,但其敲除菌(ΔM7)并未发现有耐药性产生.SNP分析以及验证实验发现,M7中Cyp51A第54位氨基酸由Gly突变成Arg是M7产生耐药性的根本原因.结论 M7突变株耐药性产生的原因并非Afu5g08910基因突变,而是Cyp51A位点突变所致.