右美托咪定对肠源性脓毒症大鼠肠黏膜屏障的影响及其机制

摘要

目的探究右美托咪定(DEX)对肠源性脓毒症大鼠肠黏膜屏障的影响及其机制。方法60只8~9周龄雄性SD大鼠被随机分为脓毒症组、DEX组和对照组,每组20只。脓毒症组和DEX组通过改良盲肠穿刺法建立肠源性脓毒症大鼠模型,DEX组即刻腹腔注射40μg/kg DEX,对照组以及脓毒症组腹腔注射等量0.9%氯化钠。给药24 h后尾静脉采血1.5 ml,采用酶联免疫吸附试验测量血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平,HE染色法观察评价大鼠肠黏膜的病理学改变;采用Western blot检测肠道组织Wnt3a蛋白、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白(Cyclin D1)以及闭锁蛋白(zonula occludens 1,ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)的表达量;并通过免疫组化染色验证Wnt3a蛋白、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白(Cyclin D1)的表达。结果ELISA结果显示,脓毒症组血清中IL-1β、TNF-α、IL-6水平与对照组比较显著升高,而DEX组较脓毒症组这3种炎性因子水平显著降低(P<0.01)。HE染色显示脓毒症组大鼠肠道黏膜损伤情况较为严重,而DEX组大鼠肠道黏膜损伤明显改善。Western blot条带灰度值分析,与对照组比较,脓毒症组中Wnt3a、β-catenin及Cyclin D1蛋白的表达量升高明显(P<0.01),ZO-1、Occludin蛋白表达量明显降低(P<0.01);与脓毒症组比较,DEX组Wnt3a、β-catenin及Cyclin D1蛋白表达水平均降低(P<0.01),ZO-1、Occludin蛋白表达量均升高(P<0.01)。免疫组化染色结果中大鼠肠黏膜Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1蛋白染色情况与Western blot实验结果相同。结论DEX可通过下调Wnt/β-catenin信号通路降低相关炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6的水平,减轻炎症反应;也可上调紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达。DEX可能通过这两种机制对肠源性脓毒症大鼠肠黏膜屏障产生保护作用。