大麻二酚对人牙周膜干细胞增殖和成骨分化的影响

摘要

目的探究大麻二酚(CBD)对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)增殖和成骨分化的影响。方法从健康牙周膜组织中分离培养hPDLSCs,通过流式细胞仪检测hPDLSCs表面标志物(STRO-1、CD-146、CD34和CD45)的表达。通过MTT试剂盒检测不同浓度的大麻二酚(0.1,0.5,1,2,5,10,20,40μmol/L CBD)培养24 h后hPDLSCs的活性。将hPDLSCs分为4组:对照组、0.5μmol/L大麻二酚组(0.5μmol/L组)、1μmol/L大麻二酚组(1μmol/L组)、10μmol/L大麻二酚组(10μmol/L组)。将hPDLSCs用成骨分化诱导培养基和各组对应浓度的大麻二酚联合培养21 d,然后检测各组hPDLSCs的碱性磷酸酶(ALP)活性,通过茜素红染色观察钙化结节,通过qRT-PCR和Western blot检测Collagen Ⅰ、Runt相关转录因子2(RUNX2)和骨钙素(OCN)的mRNA和蛋白表达。结果PDLSCs主要呈长梭形,hPDLSCs中STRO-1(98.58%)和CD146(99.20%)主要为阳性表达,CD34(0.36%)和CD45(0.31%)主要为阴性表达。与0μmol/L比,0.5,1,2μmol/L CBD处理hPDLSCs后相对细胞活力均升高(P<0.05),10,20,40μmol/L CBD处理hPDLSCs后相对细胞活力均降低(P<0.05)。与对照组相比,0.5μmol/L组和1μmol/L组hPDLSCs的ALP活性、钙化结节形成量、Collagen Ⅰ、RUNX2和OCN的mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05)。与对照组相比,10μmol/L组hPDLSCs中ALP活性、钙化结节形成量、CollagenⅠ和RUNX2的mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.05)。结论适当浓度的大麻二酚可促进hPDLSCs的增殖和成骨分化。