微量接触DNA的浓缩与回收

摘要

目的 对纯化后的微量DNA进行进一步浓缩,提高DNA检验成功率.方法 将30 ml(约600pg)纯化后的微量DNA,分别采用Amicon离心超滤管和DNA Clean & ConcentratorTM-5试剂盒进行浓缩回收,用Identifiler试剂盒进行PCR扩增及分型检测,比较STR分型图谱的平均峰高、峰面积和等位基因丢失率.检验24枚白纸上的汗潜指纹,比较浓缩前后的检验效果.结果 经过Amicon离心超滤管回收后,STR分型平均峰高85.3RFU,平均峰面积为1 130.8,等位基因丢失率为66.13％.经过DNA Clean & ConcentratorTM-5试剂盒回收后,STR分型平均峰高147.5RFU,平均峰面积为1 960.2,等位基因丢失率为35.14％.汗潜指纹的DNA检验通过DNA Clean & ConcentratorTM-5试剂盒纯化浓缩,获得有效分型的数量由浓缩前的9枚提高为20枚.结论 DNA Clean & ConcentratorTM-5试剂盒可以明显提高微量DNA检材的检验成功率,效果优于Amicon离心超滤管.对白纸上的指纹,DNA Clean&Concentrator TM-5试剂盒浓缩后检验成功率升高.