子宫内膜癌中SFRP4和miR-421的表达与意义

摘要

目的探讨分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)在子宫内膜癌细胞系中的表达和miR-421对SFRP4表达的调控作用。方法分析基因表达综合数据库(GEO)中子宫内膜癌样本Microarray测序结果(GSE106191)寻找差异表达基因,对照组为数据库中同批次测序的良性增生样本。利用癌症基因组学数据分析平台(UCSC Xena)分析SFRP4表达对子宫内膜癌患者总生存期及肿瘤分级的临床意义。通过Targetscan软件找到可能与SFRP4结合的microRNAs。以子宫内膜癌细胞系(HEC-1A细胞)为实验对象,分为阴性对照组(miR-NC)、miR-421类似物组(miR-421 mimics)和miR-421抑制剂组(miR-421 inhibitor),分别转染阴性对照试剂、miR-421类似物和抑制剂,利用实时定量PCR和CCK-8法检测其对SFRP4 mRNA表达及细胞增殖能力的影响。为观察过表达SFRP4蛋白是否可回转上述改变,将HEC-1A细胞分为阴性对照组(miR-NC)、miR-421类似物组(miR-421 mimics)、miR-421类似物组+阴性质粒转染组(miR-421 mimics+vector)和miR-421类似物组+过表达质粒转染组(miR-421 mimics+pcDNA-SFRP4),分别转染阴性对照试剂、miR-421类似物、miR-421类似物和阴性质粒、miR-421类似物和SFRP4过表达质粒(pcDNA-SFRP4),利用CCK-8法检测其对HEC-1A细胞增殖能力的影响。结果Microarray测序结果发现SFRP4基因为差异表达基因,在子宫内膜癌中表达降低(P0.05)。利用Targetscan软件发现与SFRP4结合的microRNAs为miR-421。与阴性对照组相比,miR-421类似物组SFRP4 mRNA的表达水平降低,细胞增殖能力增强(均P<0.05);miR-421抑制剂组SFRP4 mRNA的表达水平增高,细胞增殖能力减弱(均P<0.05)。与miR-421类似物组+阴性质粒转染组相比,miR-421类似物组+过表达质粒转染组细胞增殖能力明显减弱(P<0.05)。结论SFRP4在子宫内膜癌中低表达,而miR-421通过靶向调控SFRP4的表达水平促进子宫内膜癌细胞的增殖。