花粉介导的花青素调节基因NtAn2转化玉米研究

摘要

利用超声波辅助花粉介导法将花青素基因NtA n2导入玉米自交系郑58,并优化超声波辅助花粉介导基因转化方法的遗传转化体系.以新鲜的郑58玉米花粉为试验材料,检测其在不同浓度的蔗糖溶液中的体外萌发率;通过正交试验设计,对超声波处理功率、处理时间、处理次数3个因素进行优化,以确定最优转化组合;对收获的籽粒进行PCR检测.结果表明,玉米自交系郑58的花粉最适宜的蔗糖溶液浓度为20％;超声波处理最佳参数为:处理功率150 W,处理时间5s/次,处理次数6次;PCR分子检测表明,其中有3粒含有阳性条带,且这3粒中有2粒呈紫色,初步证实,NtA n2已被整合到玉米基因组中,并且可以被用于对转化子的直观筛选.研究确立了超声波辅助花粉介导法遗传转化的最佳体系,为提高该植物基因转化方法的效率奠定了基础.