RNase　H在反义寡聚脱氧核苷酸抑制小鼠白血病病毒表达过程中的作用

摘要

用与Ｍｏｌｏｎｅｙ小鼠白血病病毒（Ｍｏ－ＭｕＬＶ）５＇端引物序列、ｅｎｖ－ＬＴＲ间序列及ｐｏｌ基因互补的三种反义脱氧寡核苷酸（１４ｍｅｒ，１８ｍｅｒ，３５ｍｅｒ）进行抗小鼠白血病病毒（ＳＲＳＶ）作用研究。发现它们在兔网织红细胞体外翻译系统中能抑制ＳＲＳＶｍＲＮＡ的转译，其中，３５ｍｅｒ作用最强，浓度为８μｍｏｌ／Ｌ时抑制率约４０％１４ｍｅｒ作用较弱，抑制率仅２３％；ＲＮａｓｅＨ能有效降解不对称ＰＣＲ反应合成的单链反义ＤＮＡ（１１９ｍｅｒ）与ＳＲＳＶＲＮＡ杂交体中的ＲＮＡ，加入ＲＮａｓｅＨ后，３５ｍｅｒ和１８ｍｅｒ对ＳＲＳＶｍＲＮＡ转译的抑制率分别由４２％提高到５９％和２７％提高到３３％，但１４ｍｅｒ抑制率无改变。提示反义寡核苷酸能有效地抑制ＳＲＳＶｍＲＮＡ的表达，这种作用呈序列特异性和剂量依赖性。它们可能是通过ＲＮａｓｅＨ对反义ＤＮＡ·ＳＲＳＶｍＲＮＡ杂交体中的ＲＮＡ降解所致。