DLD-1细胞上甘氨酸延伸型胃泌素受体的结合特性

摘要

目的考察人结直肠肿瘤细胞株DLD - 1上甘氨酸延伸型胃泌素受体的结合特性 ;与CCK -A和CCK -B比较 ,找出不同之处。　方法 12 5Ⅰ标记甘氨酸延伸型胃泌素 ,反相高压液相纯化。用DLD - 1细胞进行受体结合试验 ,检测甘氨酸延伸型胃泌素受体结合试验受金属离子K+、Mg2 +、Al3+及温育温度、时间的影响 ;拮抗剂竞争抑制试验比较各种拮抗剂的作用。　结果金属离子K+、Mg2 +能提高甘氨酸延伸型胃泌素受体的特异结合 ,以10 0mmol/LTrisHCl缓冲液中含 10 0mmol/LK+,2mmol/LMg2 +为最佳 ;缓冲液含二个蛋白酶抑制剂时的最大结合发生在 37℃温育 90min ;没有蛋白酶抑制剂的最大结合发生在 37℃温育 6 0min。甘氨酸延伸型胃泌素受体的结合不被特异性CCK -A受体拮抗剂或特异性CCK -B受体拮抗剂拮抗 ,能被非特异性胃泌素受体拮抗剂benzotript拮抗。结论甘氨酸延伸型胃泌素受体的结合特性不同于CCK -A或CCK -B受体。DLD - 1细胞上的甘氨酸延伸型胃泌素受体既能与甘氨酸延伸型胃泌素结合 ,也能与酰胺化胃泌素结合 ,是一个不同于CCK -A和CCK