耐氟菌株及其亲代菌株ATP酶基因的DNA测序

摘要

目的对变型链球菌耐氟菌株及其亲代菌株的胞膜ATP酶基因进行DNA序列分析。方法分别制备变链菌株Ingbritt及其耐氟菌株IngbrittFR的菌悬液(OD600nm=1.0),经溶菌酶、Lysis消化。按已知ATP酶基因引物设计、扩增ATP酶各片段。将ATP酶基因连接至PUCmT克隆载体,转化后经限制性内切酶酶切鉴定为阳性克隆。采用DG1G1E检测ATP酶基因,DNA测序试剂盒分析DNA序列。结果耐氟菌株与其亲代菌株的核苷酸序列无显著差别。结论ATP酶基因改变不是变链菌株耐氟突变的机制。