高效液相色谱法测定SHR尿液中犬尿喹啉酸含量的变化

摘要

目的建立高效液相色谱荧光法测定尿液中犬尿喹啉酸（KYNA）含量的方法,观察不同周龄自发性高血压大鼠（SHR）及其正常对照大鼠（WKY）的尿KYNA含量变化。方法高效液相色谱荧光法采用的色谱柱为ODS色谱柱,流动相为10 mmol/L醋酸钠缓冲液（pH4.5）和乙腈（体积95∶5）,激发波344 nm,发射波398 nm。选择4周龄WKY大鼠和SHR各4只、16周龄WKY大鼠和SHR各6只检测24 h尿液中的KYNA含量,并进行统计学分析。结果KYNA浓度检测的线性范围0.220-33.000nmol/mL（R^2=0.999 1）,回收率为（90.37±8.47）%,日内差异为4.70%-9.40%,日间差异为5.20%-7.50%。4周龄WKY组24 h尿KYNA含量为（41.251±22.663）μg/24 h尿,SHR组为（35.387±10.814）μg/24 h尿,两组间无统计学差异（P〈0.05）;16周龄SHR尿KYNA含量为（39.511±15.985）μg/24 h尿,较WKY组（90.690±42.189）μg/24 h尿明显降低（P〈0.05）。结论高效液相色谱荧光方法具有灵敏、稳定、特异性高等特点,可用于临床检测尿KYNA。成年SHR尿KYNA含量较WKY大鼠减少,提示可能与高血压的发生发展有关。