雷帕霉素联合环孢素A抑制血管内皮细胞增殖的机制研究

摘要

目的探讨雷帕霉素(Rapa)对经环孢素A(Cs A)诱导的血管内皮细胞增殖的抑制作用及可能的作用机制。方法以不同浓度的Rapa干预经Cs A诱导增殖的人脐静脉内皮细胞株,3H-胸腺嘧啶核苷掺入法和3H-亮氨酸掺入法测定细胞DNA和蛋白质合成,放射免疫分析法检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的分泌情况,Western blotting检测细胞信号蛋白核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)和细胞外信号调节激酶(ERK2)的表达。结果与Cs A组比较,Cs A+Rapa干预组血管内皮细胞DNA和蛋白质合成受到显著抑制,细胞培养上清液及蛋白提取液中AngⅡ的含量显著减少,且呈Rapa剂量依赖性。Western blotting检测结果显示:与Cs A组比较,Cs A+Rapa(10 nmol/L)干预组和Cs A+Rapa(100 nmol/L)干预组p70S6K表达明显减少;而ERK2的表达在Cs A+Rapa干预组中虽呈剂量依赖性下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Rapa可能通过抑制细胞信号蛋白p70S6K的表达,阻断PI3K-p70S6K信号通路,抑制Cs A刺激的血管内皮细胞分泌AngⅡ,从而抑制血管内皮细胞的增殖。Rapa联合Cs A的免疫抑制方案有利于抑制移植物血管内皮细胞的增殖。