人牙龈成纤维细胞复制性衰老模型的构建

摘要

目的·构建人牙龈成纤维细胞(hGFs)复制性衰老模型,探讨衰老相关生物学改变,为牙周疾病衰老相关研究提供有效的细胞模型。方法·取健康牙龈组织,利用组织块法体外培养hGFs,免疫荧光染色验证组织来源;连续传代培养,计算累积细胞群体倍增指数(CPD)并绘制曲线;取CPD值为10.82、20.65、29.52、42.22、60.79、70.03的hGFs,CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力改变,real-time PCR检测衰老相关基因p16^(INK4a)、p21^(Cip1)的表达变化。结果·连续传代培养后,CPD值逐渐增大,达70.03时进入平台期;随着CPD值的增大,hGFs细胞形态呈扁平状,细胞突起增多;细胞增殖能力减弱;p16^(INK4a)、p21^(Cip1) mRNA表达水平显著升高(P=0.000)。结论·连续传代培养可构建hGFs复制性衰老模型,CPD曲线可反映细胞衰老状态。