辐照对高羊茅愈伤组织诱导及农杆菌介导转化的影响

摘要

以高羊茅成熟种子及产生的愈伤组织为试验材料,研究了辐照对愈伤组织诱导和农杆菌介导转化的影响。结果表明,5～20Gy辐照对高羊茅成熟种子诱导愈伤组织有一定的促进作用,使出愈率比对照提高4.7%～12.3%,其中以10Gy处理的效果最好,剂量超过30Gy对愈伤组织形成产生抑制作用。其转化前,愈伤组织被1～4Gy的剂量辐照处理,其GUS瞬间表达率随剂量的增加逐渐提高,但当剂量高于4Gy时,愈伤组织的GUS瞬间表达率随剂量的增加而下降。综合考虑辐照后愈伤组织的存活率和GUS瞬间表达率,2Gy为高羊茅愈伤组织转化的最佳剂量。深入观察表明,辐照后继代培养24h最适合农杆菌介导感染。