活血消异方改善子宫内膜异位症大鼠卵泡发育的机制探讨

摘要

目的 从卵巢颗粒细胞凋亡与自噬相互作用的角度,探讨活血消异方对子宫内膜异位症大鼠卵泡发育的影响及作用机制。方法 将动情周期正常的48只SD大鼠分为空白组、假手术组各10只,剩余的分为供体组(n=5)和受体组(n=23)用于造模,造模成功后的20只大鼠又分为模型组、活血消异方组各10只。活血消异方组予活血消异方汤剂2 ml灌胃,空白组、假手术组、模型组均予蒸馏水2 ml灌胃,各组连续灌胃15 d后,检测大鼠血清活性氧(ROS)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)水平。取各组大鼠的卵巢组织行HE染色,光镜下观察各级卵泡形态并计数;免疫组化染色定位颗粒细胞,并比较凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达;TUNEL染色观察颗粒细胞凋亡情况并计算凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织中凋亡及自噬相关蛋白p-JNK、Bax、Bcl-2、Caspase-3、Beclin-1、LC3Ⅱ的表达;电镜观察各组大鼠卵巢颗粒细胞自噬体形态,并计算自噬体胞质面积比。结果 (1)与空白组、假手术组比较,模型组血清ROS含量显著升高,T-SOD、CAT水平显著降低(P0.05)。结论 活血消异方可能通过ROS-JNK信号通路,改善子宫内膜异位症大鼠氧化应激状态,减少卵巢颗粒细胞凋亡,启动颗粒细胞保护性自噬,改善子宫内膜异位症大鼠卵泡发育。