人工合成RGD小肽对肝星状细胞分泌细胞外基质的影响

摘要

目的:探讨精氨酰甘氨酰天冬氨酸肽(Arg-Gly-Asp, RGD)对肝星状细胞分泌细胞外基质(extracellular matrix, ECM)的影响.方法:利用化学方法合成RGD;应用胶原酶原位灌注法分离SD大鼠原代肝星状细胞(hepatic stallate cell, HSC),接种培养48h后,随机分成4组:①空白对照组;②转化生长因子β1(transforming growth factor β1, TGF β1)组:只加TGF β1(终浓度5ng/ml);③RGD组:只加RGD(终浓度100μg/ml);④联合加药组:加RGD(终浓度100μg/ml)同时加TGF β1(终浓度5ng/ml).连续培养3d后,放射免疫分析细胞上清液各项ECM含量变化.结果:与空白对照组相比,TGF β1组和联合加药组细胞上清液中透明质酸(hyaluronic acid, HA)、层粘连蛋白(laminin, LN)和Ⅲ型前胶原(procollagen Ⅲ, PCⅢ)水平均显著增高,RGD组细胞上清中各项ECM水平则无明显改变;与TGF β1组相比,联合用药组HSC细胞上清LN和PCⅢ水平明显降低.结论:RGD明显降低HSC培养上清中LN和PCⅢ含量,表明RGD能抑制原代HSC合成及分泌ECM,其机制可能与竞争性结合整合素有关.