Smad3基因小干扰RNA的序列设计及其表达载体的构建

摘要

目的 构建大鼠Smad3基因小干扰RNA的表达质粒,为肝纤维化RNAi介导的基因治疗打下基础.方法 利用互联网资源针对Smad3基因设计并合成i条可能的小干扰RNA,脂质体瞬时转染大鼠肝星状细胞,RT-PCR检测Smad3基因的表达情况.然后将这三条小干扰RNA插入到RNA十扰载体pRNAT-U6.1/Neo中,构建成三条十扰载体并测序.结果 RT-PCR和测序结果表明,成功构建了Smad3基因的RNA干扰真核表达载体.结论 重组质粒pRNAT-SiSmad3的成功构建,为后续的Smad3基因下调实验提供了可能.