Sirt1在银屑病皮损中的表达及对连接蛋白表达的影响

摘要

目的 研究Sirt1和连接蛋白在银屑病皮损中的表达,以及Sirt1的异常表达与活化对体外培养的人永生化角质形成细胞株(HaCaT细胞)连接蛋白表达水平的影响.方法 ①利用免疫组化技术检测银屑病皮损中Sirt1、紧密连接蛋白(ZO-1、occludin)、黏着连接蛋白(E-cadherin)的表达与定位.②体外培养皮肤HaCaT细胞,利用Sirt1的特异性激活剂(白藜芦醇)和抑制剂(烟酰胺)诱导Sirt1异常表达,经反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Sirt1激活剂、抑制剂对Sirt1基因表达水平的影响;利用蛋白质印迹试验(Western blotting)检测相同条件下Sirt1、紧密连接蛋白、黏着连接蛋白的蛋白表达水平.结果 ①与正常人皮肤组织相比,Sirt1在银屑病皮损中表达水平下降,连接蛋白ZO-1、occludin、E-cadherin表达水平均显著升高.②与对照组相比,白藜芦醇可显著增加HaCaT细胞Sirt1的基因和蛋白表达水平,Sirt1的表达与活化明显降低了HaCaT细胞连接蛋白的表达水平.结论 Sirt1可能具有下调银屑病角质形成细胞间连接蛋白表达的功能.