鼠抗SARS病毒X4蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要

目的:制备SARS病毒X4蛋白的单克隆抗体,探讨X4蛋白的结构和功能,以及临床应用的价值。方法:以重组SARS病毒X4蛋白为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞进行常规融合,通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得鼠抗SARS病毒X4蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过ELISA,Westernblot和免疫荧光实验等方法鉴定其特性。结果:成功地建立了3株稳定分泌抗X4蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为8A5,8H6和4A2。3株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为IgG2a。通过ELISA,Westernblot等方法的鉴定,抗X4蛋白的单克隆抗体能与X4蛋白发生特异性反应。免疫荧光实验的结果表明,X4蛋白的单克隆抗体能与SARS病毒感染的VeroE6细胞发生特异性结合。结论:获得了特异性识别SARS病毒X4蛋白的单克隆抗体,为SARS病毒X4蛋白的生物学功能研究奠定了基础。