CD4^(+)T细胞糖酵解在舍格伦综合征中的表达及作用

摘要

目的:探究糖酵解与舍格伦综合征(Sjögren′s syndrome,SS)疾病发展的关系。方法:利用磁激活细胞分选(magnetic-activated cell sorting,MACS)法提取CD4^(+)T细胞,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测糖酵解节点因子的转录情况。选用雌性NOD/Ltj小鼠作为SS模型鼠,XF96代谢分析仪检测CD4^(+)T细胞的糖酵解速率。采用饮水法给予NOD/Ltj小鼠糖酵解抑制2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)。戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠进行刺激性唾液流率检测;提取小鼠下颌下腺并进行HE染色和病理性评分;多重免疫荧光组织化学(multiplex immunohistochemistry,mIHC)法对小鼠的免疫细胞进行标记;RT-qPCR检测NOD/Ltj小鼠中Th1与Th17代表基因干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)水平变化。结果:SS患者的CD4^(+)T细胞中,HK2、PKM和MYC等糖酵解因子表达上调。同时,SS疾病小鼠CD4^(+)T细胞糖酵解潜能也高于对照组小鼠。抑制糖酵解可有效恢复小鼠唾液流率、减少淋巴细胞尤其是CD4^(+)T细胞的浸润,抑制Th1和Th17相关因子在病变唾液腺的表达。结论:SS发病时,CD4^(+)T细胞存在高水平的糖酵解,并部分参与了疾病进程。