猪卵母细胞激活方法的研究

摘要

[目的]探讨猪卵母细胞体外胚胎生产的最佳激活条件.[方法]以不同电场强度(100,150,200,250V/mm)、脉冲时间(2,30,40,60,80 μs)、电脉冲次数(1,2,3次)的电激活方法及电激活(是电场强度为200 V/mm,脉冲时间为60 μs,激活次数为1次)联合化学处理(NCSU-23+CHX、NCSU-23+6-DMAP和NCSU-23+CHX+6-DMAP)方法对猪卵母细胞进行激活,研究不同激活方法对猪卵母细胞孤雌活化的影响.[结果]电激活猪卵母细胞时,在200 V/mm、60 μs、1次激活的条件下其卵裂率和囊胚率均最高.电激活联合NCSU-23+CHX、NCSU-23+6-DMAP、NCSU-23+CHX+6-DMAP化学处理时,在孤雌激活后期的卵裂率分别为69.17%,82.31%和79.67%,囊胚率分别为24.17%,39.46%和39.84%,在统计学上各处理间无显著差异.[结论]猪卵母细胞孤雌激活的最佳条件,是在电场强度为200 V/mm,脉冲时间为60 μs.激活次数为1次的电激活后,联合NCSU-23+6-DMAP处理4 h,再移入胚胎培养液NCSU-23+4 g/L BSA中继续孵育(40±4)h.