肾小管免疫组织化学非特异性反应的控制方法探讨

摘要

目的 观察抗体质量和封闭方法对肾小管免疫组织化学非特异性反应的影响,探讨其控制方法.方法 采用免疫组织化学SP法检测肾脏血管平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,SMA),对比观察不同公司的抗体及不同封闭方法对肾小管非特异性免疫组织化学染色的影响.结果 各组采用正常山羊血清封闭,不同抗体检测结果可见:1号抗体组,肾小管上皮细胞内可见弥漫性棕黄色颗粒状着色,且在肾脏皮质区内远曲小管为重;2号抗体组,染色结果与1号抗体基本相同;3号抗体组,肾脏组织中血管平滑肌细胞内均呈棕黄色着色,肾小管上皮细胞内未见着色.各组分别采用正常山羊血清、5%BSA、25%蛋清液及正常山羊血清+25%蛋清混合液封闭后的染色结果可见:1号抗体组,采用正常山羊血清+25%蛋清混合液封闭后,肾小管上皮细胞染色强度减轻;2号抗体组,在使用不同封闭液的各组间,未见差别;3号抗体组,肾小管上皮细胞内未见着色,其中,25%蛋清+正常山羊血清混合封闭的效果最佳.结论 在免疫组织化学技术中,选择适当的封闭液和抗体是有效控制非特异性染色的重要因素.