抗药性相关糜蛋白酶基因真核表达载体的构建和鉴定

摘要

目的:构建抗药性相关基因真核表达载体。方法:采用PCR方法,以淡色库蚊抗药性品系cDNA文库为模板,扩增出抗药性品系中高表达糜蛋白酶(chymotrypsin)基因,经T/A克隆测序鉴定后,扩增、纯化质粒,经双酶切后纯化目的片段,克隆到真核荧光表达载体pEGFP-C3中。结果:PCR和酶切鉴定表明,构建成功真核荧光表达载体pEGFP-C3/chymotrypsin。结论:PCR加双酶切鉴定的方法构建表达质粒,迅速省时,结果可靠。