流感疫苗脂质体干粉制备方法对其免疫原性影响研究

摘要

目的:考察薄膜分散及冻融冻干法制备H1N1单价流感疫苗脂质体呼吸道免疫效果,为减毒活疫苗脂质体的制备奠定基础。方法:将实验小鼠分为4个实验组(脂质体疫苗干粉肺部免疫组、腹腔免疫组,非脂质体疫苗原液肺部免疫组、腹腔免疫组),和1个阴性对照组。实验组以每只4μg和6μg血凝素含量(H1N1亚型)肺部免疫或腹腔免疫,以未免疫小鼠(PBS给药)为阴性对照。免疫7、14、28 d,血凝抑制试验(HI)检测免疫后小鼠血清抗HA抗体水平,ELISA检测血清中细胞因子含量。结果:两种方法制备的脂质体组6μg剂量肺部免疫抗体滴度高于4μg剂量肺部免疫(P<0.05);两种方法制备脂质体肺部免疫抗HA抗体滴度高于非脂质体肺部免疫(P<0.05)。脂质体组肺部免疫抗HA抗体滴度高于非脂质体组腹腔免疫(P<0.01);薄膜分散法优于冻融冻干法组;两种方法制备的脂质体肺部免疫产生的白细胞介素(IL)-2与干扰素(IFN)-γ水平高于疫苗原液腹腔免疫,均高于阴性对照组。结论:两种方法制备流感疫苗脂质体肺部给药均能有效诱发体液免疫及细胞免疫,薄膜分散法优于冻融冻干法,均高于疫苗原液组;冻融冻干法肺部免疫14 d即产生免疫应答,而原液腹腔免疫抗体滴度比仅为1.8。冻融冻干法组脂质体肺部免疫产生的细胞因子水平也明显高于疫苗原液腹腔免疫组。说明冻融冻干法在疫苗脂质体制备中具有可行性。